היברידיזציה באתר (In situ hybridization, ISH) היא שיטה לקביעת מיקומו של רצף DNA על הכרומוזום. משתמשים בגלאי, גדיל DNA או RNA, שמתחבר לרצף המשלים שלו. הכלאה כאן פירושה חיבור בין שני גדילי DNA בעלי רצפי בסיסים משלימים. המונח "אין סיטו" פירושו "במקומו המקורי".
השיטה דומה לתספיג דנ"א, אבל ההכלאה נעשית ישירות עם הכרומוזום עצמו. בדרך כלל הגלאי מסומן בחומר פלואורסצנטי, צבע זוהר שנראה במיקרוסקופ מיוחד. כשמניחים את הגלאי על תתקין של כרומוזומים, הוא מתחבר לרצף המתאים, וניתן לראות אותו תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי.
משתמשים בצבעים שונים לגלאים שונים כדי להבחין בין רצפים סמוכים. בנוסף, ניתן להסתכל על פספוס אופייני של כרומוזומים, דפוס של פסים כהים ובהירים, כדי למקם את הגלאי בדיוק רב יותר. שימוש בשני גלאים בצבעים שונים מאפשר לקבוע גם את הסידור הפיזי של שני סמנים על הכרומוזום.
ביישומים רפואיים השיטה מסייעת לזהות אזורים חסרים בכרומוזום של חולים עם תסמונות גנטיות. במחקר על סרטן מצאו שחריגות כמו מחיקות או תוספות אופייניות לסוגי סרטן מסוימים. במחקרי יסוד ה-FISH עזר להבין את הטופולוגיה של הגרעין: כל כרומוזום תופס אזור ספציפי בגרעין, והמיקום יכול להשתנות לפי סוג התא.
זו שיטה למצוא נקודת DNA על הכרומוזום. משתמשים בגלאי, חתיכת DNA או RNA. "אין סיטו" משמעותו במקומו הטבעי.
הגלאי מצוין בצבע זוהר. צבע זה נקרא פלואורסצנטי, כלומר צבע שמאיר כשמאירים עליו. אחרי ההכלאה רואים את המקום במיקרוסקופ מיוחד.
מפעילים גלאים בצבעים שונים כדי להבחין בין מקומות קרובים. רופאים משתמשים בשיטה כדי לגלות חלקים חסרים בכרומוזום של חולים. מדענים גילו שכרומוזומים יושבים במקומות קבועים בגרעין התא.
תגובות גולשים